Partie 3. Effets de champs électromagnétiques à très basse fréquence sur l'inhibition des cellules tumorales et le mécanisme possible 
Discussion
L'exposition magnétique Feld a le potentiel de servir de stratégie avancée dans la gestion du cancer . ROS produit
par les cellules utilisant cette méthode semble être la clé de l'inhibition de la croissance tumorale3. Nous avons prouvé que le mécanisme principal
n'était pas seulement lié à ROS mais aussi étroitement lié au contact entre les cellules ., nous épeignions que le magnétique
L'exposition FELD a changé la sécrétion de certains substrats, conduisant aux changements de signalisation et donc de restauration
Inhibition du contact des cellules tumorales . basée sur les résultats expérimentaux et les expériences précédentes, quatre propriétés de
La suppression magnétique FELD a été résumé .
1.Les expériences sur l'inhibition du champ magnétique des cellules, en particulier les cellules Raji, ont montré que le contact étroit
entre les cellules, directement déterminées si l'effet d'inhibition existait . comme le montre les Fig . 2 a, 3a et c,
L'agrégation en suspension a accéléré la croissance des cellules tumorales en suspension, tandis que l'exposition au champ magnétique
inhibé la croissance des cellules tumorales . comme le montre la figure . 3 C, le taux d'inhibition du champ magnétique variait le jour 9
Selon la zone du bas du conteneur . le nombre de cellules exposées agglées dans une zone de 55
CM2 était significativement plus élevé que celle dans une zone de 25 cm2, mais aucune différence significative n'a été trouvée entre
Le nombre de cellules exposées agglales et celles du groupe témoin non exposé . pendant cette période, le
L'inhibition des cellules tumorales en suspension a disparu, indiquant que la distance entre les grappes cellulaires s'est étendue
et la croissance cellulaire a accéléré . au contraire, dans le ballon de culture 25- cm2, la différence dans le nombre de
Les cellules entre les groupes exposés et témoins ont augmenté de manière significative, c'est-à-dire que le taux d'inhibition a augmenté .
Cela a indiqué que les cellules tumorales ont récupéré l'inhibition du contact sous exposition magnétique sur le champ . par conséquent, le
L'inhibition du champ magnétique nécessitait un contact étroit entre les cellules .
2.L'expérience avec des cellules adhérentes a montré que les cellules tumorales étaient plus sensibles à l'inhibi magnétique
tion en utilisant des supports conditionnés plus adaptés à la croissance cellulaire . comme le montre la figure . 1 B et C, le nombre de tumeurs
Les cellules du milieu conditionné du groupe témoin non exposé étaient significativement plus élevées que dans le frais
le milieu, tandis que le nombre de cellules tumorales dans le milieu conditionné du groupe exposé était significativement
plus bas que dans le milieu frais (l'effet d'inhibition magnétique était significativement plus élevé dans le groupe de perfusion
que dans le groupe de changement) . Il a été suggéré que le milieu conditionné convenait non seulement au
croissance exponentielle des cellules en l'absence du champ magnétique mais aussi la communication entre les cellules,
qui a augmenté l'effet d'inhibition de contact sous le champ magnétique . par conséquent, l'inhibition du champ magnétique
Le taux dépendait de la stabilité de l'environnement pour étendre l'inhibition de contact .
3. Nous avons déterminé que certains substrats dans le milieu conditionné ont également contribué à l'inhibition magnétique .
Une inhibition a été observée lorsque le milieu conditionné du groupe de perfusion (A549) a été transféré à des
cellules après exposition magnétique sur le champ, démontrant la présence de signaux d'inhibition dans le milieu .
Les cellules tumorales en suspension étaient moins sensibles à l'inhibition magnétique par rapport aux cellules tumorales adhérentes .
De plus, l'agrégation cellulaire a été inévitablement affectée lors du transfert des supports conditionnés . par conséquent,
Plus de conception et de considération ont été nécessaires pour le transfert de support conditionnel de suspension des cellules tumorales .
Dans une étude de cellules xénogéniques dans laquelle les milieux conditionnés des cellules normales 293 T et les cellules tumorales A549 étaient
Échangés et transférés dans des cellules non exposées après une exposition au champ magnétique, les cellules tumorales ont montré une inhibition
Bien que les cellules normales n'aient pas montré d'inhibition significative ., cela a indiqué que certains substrats interagissent avec
Le champ magnétique était omniprésent dans les cellules sensibles aux cellules tumorales . Figure 5C et D indique que ces substrats
a également existé dans les cellules non ou inhibés et n'a pas inhibé la croissance des cellules non tumorales ., il a été supposé que le contact
L'inhibition de la capacité des cellules non anorales n'a pas été réduite au silence et, par conséquent, la croissance des cellules non tumorales n'a pas été inhibée
par ces substances ., le nombre de cellules témoins sans transfert était plus élevé que celle du groupe de transfert, éventuellement
Parce que le milieu de condition A549 ne convenait pas à la croissance des cellules non tumorales . sur la base des résultats
D'une inhibition magnétique réduite après dispersion des cellules de suspension ou séparation des grappes, il a été supposé que le
Les substrats peuvent être liés à la communication intercellulaire et à l'inhibition du contact cellulaire . Le signal intercellulaire
augmenté et l'inhibition du contact a disparu lorsque les cellules ont été suspendues et séparées ou que les touffes étaient trop
loin à part . par conséquent, les cellules ont sécrété un ou plusieurs substrats, et les champs magnétiques à basse fréquence ont interagi avec
Les cellules et les substrats pour inhiber spécifiquement les cellules tumorales .
La relation entre les substances pertinentes, les milieux conditionnés et l'inhibition des contacts nécessite une expérience supplémentaire
Vérification mentale .
4. Notre champ magnétique à basse fréquence in vitro avait un point commun que l'inhibition magnétique
L'efficacité a augmenté avec l'augmentation du temps d'exposition lorsque les cellules se sont regroupées et l'environnement de culture
était stable (médium conditionné du groupe de perfusion), ce qui était cohérent avec la plupart des rapports actuels . moyens
tandis que la plupart des rapports ont également suggéré que l'intensité du champ magnétique était positivement corrélé avec le magnétique
Efficacité . Par conséquent, l'efficacité de suppression magnétique était positivement corrélée avec le temps d'exposition de MAG
Intensité du champ netic2,3,19, 20.
Pour l'exposition au champ à basse fréquence, la coloration Blue Trypan n'a révélé aucune coloration cellulaire évidente et aucune signification
différence d'activité cellulaire, qui pourrait être liée au fait que la mort cellulaire n'a pas été observée en raison de la tache directe
après le traitement ., il a indiqué que le champ magnétique n'a pas tué directement les cellules, mais induit en continu
apoptose; Par conséquent, les cellules n'ont pas été colorées avec du bleu trypan . d'autres rapports ont montré que l'intracellulaire
L'activité Caspase -3 a été régulée à la hausse et l'intégrité de la membrane a diminué après l'exposition du champ magnétique2, 3 .
Les rapports ont révélé que certaines cellules tumorales avaient une efficacité de coloration19, qui pourrait être liée au type de cellule et à la détection
La sélection du temps . La coloration de l'annexine V a également montré une inhibition magnétique progressive . cependant, l'effet variait
par type de cellule 2 .
L'effet spécifique des champs magnétiques sur la signalisation dans l'environnement cellulaire n'est pas encore clair . La signalisation
La voie impliquée dans le champ magnétique peut être liée à l'inhibition des contacts et à l'héritage épigénétique . invité
Par signaux cellulaires1,22,27-29, nous supposons la présence de signaux électriques entre les cellules et les ions calcium, qui
Le deuxième messager est-il associé à la division cellulaire . Plusieurs expériences de sonde fluorescente ont montré que le
Le changement du potentiel de la membrane était lié à l'exposition au champ magnétique et au potentiel de la membrane
La réaction était différente entre les cellules adhérentes et en suspension . Le potentiel membranaire des cellules adhérentes a tendance à
être hyperpolarisé sous le champ magnétique . Le potentiel membranaire des cellules tumorales en suspension groupées tendues
Pour dépolariser sous le champ magnétique .
Réponse de communication sous le champ magnétique . comme le montre la figure . 3 C et E, cellules Raji suspendues et isolées
s'est développé plus vite sous le champ magnétique . Les résultats de l'équipe de Yong Zhou27 ont expliqué ce phénomène . la cellule
Le taux de croissance a augmenté pendant la dépolarisation, ce qui impliquait la nanoagrégation des commutateurs K-Ras sur le
Surface de la membrane . Les cellules tumorales en suspension dispersées les unes avec les autres, la signalisation intercellulaire par certains
Les substances ont augmenté et l'inhibition du contact cellulaire induite par le champ magnétique a disparu . Pendant ce temps, la cellule
Le potentiel membranaire des cellules tumorales en suspension a été dépolarisé, ce qui a accéléré la croissance cellulaire et l'inhibition
diminué ou disparu . le signal de calcium intracellulaire et le potentiel de la membrane avec le changement dans le
Le champ magnétique a été relativement synchronisé (sauf A549) . Nous avons émis l'hypothèse que la concentration en ions calcium
était associé au potentiel de la membrane sur l'exposition au champ magnétique . en plus, seulement 293 cellules T ont montré
Différences significatives dans la concentration d'ions calcium lorsqu'elle est exposée au champ magnétique .
lié à l'hyperméthylation du réseau de signalisation de calcium associé à la tumeur 30. à l'heure actuelle, la relation
entre la concentration en ions calcium et le potentiel de la membrane et le signal d'inhibition du champ magnétique n'est pas
Clear . En outre, le pH intracellulaire des cellules A549 a augmenté sous le champ magnétique .
Le fait que les cellules A549 étaient plus sensibles au champ magnétique . également, cela pourrait être la raison pour laquelle le calcium
Le changement dans les cellules A549 n'a pas été synchronisé avec le potentiel membranaire .
Cette étude avait certaines limites . Dans les expériences sur les cellules tumorales en suspension, nous avons utilisé une pipette pour détruire
la structure du cluster, et nous n'avons pas pu garder les cellules séparées tout le temps pendant l'exposition magnétique sur le champ .
De plus, nous n'avons pas pu maintenir l'agrégation cellulaire pendant le transfert dans des conteneurs plus grands tous les 3 jours . pour détecter
Ions ing et potentiel membranaire, nous savions que le potentiel de la membrane était lié à l'exposition au champ magnétique .
Cependant, le kit ne pouvait mesurer que l'état d'une certaine période, et donc la détection synchrone en temps réel est
nécessaire pour clarifier la relation spécifique . en outre, les changements dans le potentiel membranaire ont également indiqué le
Changements dans les signaux intracellulaires . Par conséquent, il a été supposé que le potentiel membranaire pouvait être utilisé comme le
signifie vérifier l'effet inhibiteur du champ magnétique sur les cellules tumorales .
Combinant les quatre propriétés clés susmentionnées de l'effet inhibiteur du champ magnétique sur les cellules
pourrait servir de bonne modalité anticancéreuse adjuvante . à l'heure actuelle, la thérapie par champ magnétique a augmenté
Attention . En outre, l'universalité des signaux cellulaires avec exposition magnétique sur le champ et le large spectre de
Les tumeurs le rendent une excellente méthodologie pour le traitement et le pronostic . nos résultats, ainsi que d'autres rapports,
a en outre révélé le potentiel de la thérapie de champ magnétique . Notre prochaine étude se concentrera sur les mécanismes impliqués
Dans les champs magnétiques, en commençant par des substrats .
Méthodes
Kit de test .Un kit de sonde calcique Calbryte 520 AM (article no . 20650) a été acheté auprès d'Aatbioquest (USA) .
Tampon de Hanks avec HEPES de 20 mm (point n ° . 20011) et dibac4 (3) sonde fluorescente potentielle de la membrane
(L'article no . 21411) a également été acheté auprès d'Aatbioquest . une sonde fluorescente à ion sodium sbfi (article n . 18764)
a été acheté auprès de Cayman Company (USA) . Une sonde fluorescente à ion potassium pbfi (article no . 21602)
Acheté à la société Cayman . pluronic f -127 (ST 501-10 G) a été achetée auprès de Beyotime Biotechnol
Ogy .
Culture cellulaire .293 cellules T, cellules Hepg2 et cellules A549 ont été obtenues à partir de la banque cellulaire de l'Acadé
Emy of Sciences (Shanghai, Chine) . Les lignées cellulaires ont été cultivées en DMEM (Biological Industries, Israël) avec
10% sérum bovin fœtal (FBS, Excel Bio, Chine) et 1% de pénicilline - streptomycine (P / S, industries, Israël) .
Les cellules ont été incubées à 37 degrés en présence de 5% de CO 2. Toutes les opérations ont été menées à l'intérieur du flux vertical
banc propre .
Les cellules Raji ont été cultivées dans le milieu RPMI1640 (industries biologiques) avec 10% de FBS et 1% P / S .
Les cellules ont été incubées à 37 degrés en présence de 5% de CO 2. Toutes les opérations ont été menées à l'intérieur du flux vertical
banc propre .
Exposition et caractéristiques du champ magnétique .Le générateur de champ magnétique auto-fabriqué a converti Elec
Signaux tricaux dans les signaux de champ magnétique à travers un fil de cuivre émaillé (Fig . 6, Fig . S4) . Le shell a été fabriqué
de l'acrylonitrile butadiène styrène matériau plastique avec spécifications: 450 × 230 × 25 (l × d × h, mm3) . le magazine
La sortie du champ nétique pourrait être modifiée en ajustant la fréquence et l'amplitude de la tension d'alimentation de l'alimentation de
L'équipement vers le dispositif de génération de champ magnétique . Le dispositif de génération de champ magnétique a été placé dans un
L'incubateur et le champ magnétique ont été mesurés avec un mètre Gauss (TES 1393; TES Electrical Electronic Corp,
Taiwan) . Les cellules du groupe non exposé ont été placées dans le même incubateur (Thermo Scientific, USA) .
La direction du champ magnétique était perpendiculaire au générateur de champ magnétique . pendant toute l'expérience,
L'intensité du champ magnétique parasite dans chaque incubateur était inférieure à 0. 02 MT (0–0,02 MT), et la température
Ture a été ajustée à 37 ± 0 . 18 degrés.
Comptage de cellules .Cellules adhérentes: le surnageant a été collecté dans un tube à centrifugeux et lavé deux fois avec
Saline normale . Le surnageant nettoyé a été extrait, ajouté au tube à centrifugeuse, puis digéré avec
Graphique 6.Système d'exposition au champ magnétique . (a) Diagramme schématique du système d'exposition au champ magnétique . Détails
sont décrits dans la section des méthodes . (b) Field de champ magnétique .
Nous continuerons à mettre à jour le contenu du journal, alors restez à l'écoute de notre section de connaissances de l'industrie!